SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4463—2016 国境口岸布鲁氏菌荧光PCR检测方法 Test of Brucellosis with real-time PCR at frontier port 行业标准信息服务平台 2016-03-09发布 2016-10-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 国境口岸布鲁氏菌荧光PCR检测方法 SN/T4463-2016 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029） 务平台 北京市西城区三里河北街16号（100045) 总编室：（010)68533533 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×1230 1/16 印张0.5 字数10千字 2016年8月第一版 2016年8月第一次印刷 印数1-1100 * 书号：155066·2-30464 定价14.00元 SN/T4463—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：吴忠华、吕沁风、郑伟、罗鹏、徐琦、何蕾、李莉、蔡玉峰、杨永耀。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4463—2016 国境口岸布鲁氏菌荧光PCR检测方法 1范围 本标准规定了国境口岸布鲁氏菌的荧光PCR检测方法。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 WS269布鲁氏菌病诊断标准 3缩略语 下列缩略语适用于本文件。 DNA：脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid) dNTP：脱氧核苷三磷酸（deoxyribonucleosidetriphosphate） PCR：聚合酶链反应（polymerasechainreaction) 4对象 4.1 疑似感染布鲁氏菌的出人境人员或动物。 疑似污染布鲁氏菌的物品。 5 生物安全要求 所有有关布鲁氏菌的实验室操作应按照以下规定执行： 大量活菌操作或动物感染实验在生物安全三级（BSL-3或ABSL-3）实验室内进行； 布鲁氏菌标本检测操作在生物安全二级（BSL-2）实验室内进行； 布鲁氏菌相关的无感染性的材料操作在生物安全一级（BSI-1)实验室内进行； 布鲁氏菌感染性材料运输包装分类为A类，UN编号为UN2814 6试剂 在实验过程中需要以下试剂： 引物和探针： · 上游引物BRF1:5'-caagggcaaggtggaagatt-3'； 下游引物BRR1:5'-ctgcgaccgatttgatgttt-3'; 。荧光探针FPBRl:5'-fam-atcgtttccgggtaaagcgtcgcca-P-3; 1