SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4684—2016 进出口化妆品中洋葱伯克霍尔德菌 检验方法 Determination of Burkholderia cepacia in cosmetics for import and export 行业标准信息服务平台 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4684—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准主要起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局、完美（中国）有限公司。 本标准主要起草人：赵晗、崔淑华、孙军、郝莹、田国宁、吴兴海、高业成、贾俊涛、段效辉、李建军。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4684—2016 进出口化妆品中洋葱伯克霍尔德菌 检验方法 1范围 本标准规定了进出口化妆品中洋葱伯克霍尔德菌的检测方法， 本标准适用于进出口化妆品中洋葱伯克霍尔德菌的定性检测。 2 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB7918.1化妆品微生物标准检验方法 总则 GB19489实验室生物安全通用要求 3设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下。 3.1 恒温培养箱：30℃±1℃、32℃±1℃、36℃±1℃。 3.2 均质器。 3.3振荡器。 3.4 光学显微镜。 3.5 天平：感量0.1g。 3.6 无菌移液管：1mL，10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。 3.7 无菌培养血：直径90mm（或其他商业用一次性无菌平皿）。 标准信息服务平台 3.8 接种环：3mm直径。 3.9 均质袋或均质瓶。 3.10 全自动微生物生化鉴定系统。 4培养基和试剂 4.1 含多粘菌素B的SCDLP增菌液：见A.1。 4.2 含庆大霉素的BCSA增菌液：见A.2。 4.3 含多粘菌素B、庆大霉素的BCSA琼脂：见A.3。 4.4 含多粘菌素B、庆大霉素的麦康凯琼脂（不含结晶紫）：见A.4。 4.5 革兰氏染液：见A.5。 4.6 氧化酶试验试剂：见A.6。 4.7 葡萄糖氧化/发酵管：见A.7。 4.8 蔗糖氧化培养基：见A.8。 4.9 西蒙氏枸橡酸盐培养基：见A.9。 1 SN/T 4684—2016 4.10 七叶苷培养基：见A.10。 4.11 生化鉴定试剂盒。 5 检验程序 洋葱伯克霍尔德菌检验程序见图1。 检样 10g（mL）样品+90mL稀释液 10mL+90mLSCDLP增菌液（含多粘菌素B） 36℃±1℃,24h 1mL+10mLBCSA增菌液（含庆大霉素） 36℃±1℃，24h BCSA琼脂（含多粘菌素B、庆大霉素） 麦康凯琼脂（含多粘菌素B、庆大霉素） 32℃±1℃，48h 挑取5个以上可疑菌落 生化试验或选用生化鉴定试剂盒 或全自动微生物生化鉴定系统 图1洋葱伯克霍尔德菌检验程序 服务平 6操作步骤 6.1 增菌培养 按照GB7918.1方法制备1：10化妆品稀释液，取稀释液10mL加到90mL含多粘菌素B的 于36℃±1℃培养18h~24h。 6.2分离培养 分别用接种环取BCSA增菌液一环，划线接种于BCSA琼脂（含多粘菌素B、庆大霉素）平板和麦康 2