SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4637—2016 地中海白蜗牛检疫鉴定方法 Detection and identification of Cernuella virgata (Da Costa,1778) 行业标准信息服务平台 2016-08-23发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T46372016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国浙江出人境检验检疫 局、中华人民共和国张家港出人境检验检疫局、中华人民共和国西藏出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：周卫川、王沛、林阳武、吴志毅、陆军、肖琼、文艺。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4637—2016 地中海白蜗牛检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了地中海白蜗牛Cernuellauirgata（DaCosta，1778）的检疫鉴定方法， 本标准适用于地中海白蜗牛的检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T3067—2011软体动物常规检疫规范 3术语与定义 SN/T3067确定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 矢囊dartsack 述矢囊的相对长度。 3.2 love dart 恋矢 矢囊中的骨针，为蜗牛交配时刺激器官，一般一个矢囊含有1枚恋矢，恋的质地和形状常用于 分类。 3.3 盲管diverticulum 受精囊柄分枝形成盲管，盲管的缺失与否是区别欧洲蜗牛科与湿螺科的主要鉴别特征。 3.4 COI 基因cytochrome coxidase subunit I 线粒体细胞色素C氧化酶亚基I,该基因为DNA条形码鉴定靶标基因，常用于物种鉴定和系统发 服务平 育关系研究。 4地中海白蜗牛基本信息 学名：Cernuella virgata（Da Costa,1778) 异名:Cochlea virgata Da Costa,1778;Helicella virgata （Da Costa,1778); Helir ariabilis Draparnaud,1801;Helia maritima Draparnaud,1805; Helix castroiana Servain,1880;Helix terrosa Locard,1899;Xerophilaeurina Clessin,1883。 英文名Common white snail,Mediterranean white snail,white snail,Vineyard snail,Striped snail, Zoned snail 1 SN/T4637—2016 分类地位：软体动物门Mollusca，腹足纲Gastropoda，肺螺亚纲Pulmonata，柄眼目Stylomma topgora，湿螺科Hygromidae，白蜗牛属Cernuella。地中海白蜗牛又称普通白蜗牛，主要近似种有忽视 白蜗牛Cernuellaneglecta（Draparnaud，1805），骏氏白蜗牛Cernuellajonica（Mousson，1854）。地中 海白蜗牛的其他信息参见附录A。 5方法原理 地中海白蜗牛主要通过运输工具、木质包装材料、花卉盆景和污染的农副产品远距离传播，污染的 谷物和橘子是其最重要的传播媒介，由于这种蜗牛喜欢在麦子收获前成群结队地爬到快成熟的麦穗上 休眠，收割和干燥作业并不能将休眠的蜗牛彻底杀灭，因而疫区谷物传播的几率是很高的。传播方式和 途径是确定现场检疫方式的依据。贝壳形态、软体特征和COI基因序列是实验室鉴定的主要依据 6器具和试剂 6.1器具 体视显微镜、放大镜、手电筒、塑料自封袋、广口标本瓶、4mm孔径土壤筛、小铁铲、游标卡尺、白瓷 盘、培养血、镊子、剪刀、显微镊子、显微剪刀、微针、解剖腊盘、标签、微型离心机、恒温金属浴、PCR仪、 1.5mL离心管、0.2mLPCR反应管、移液器。 6.2试剂 75%乙醇、无水乙醇、硫酸镁、DNA提取试剂盒、PCRMasterMix、ddHO 7现场检疫 对来自疫区（参见附录A）的麦船、谷物和橘子等农产品、木质包装材料、集装箱必须重点检查，仔细 观察船舱、集装箱的底部和四角部位以及所装货物与木质包装材料是否有蜗牛，由于该螺的生态习性不 同于其他蜗牛，喜欢在明亮的高处休眠，因此尤其要注意船仓、集装箱顶部的检查，发现任何蜗牛都应及 时杀死或作熏蒸处理。对来自疫区的原木、盆景、苗木、水果等未经加工的植物性材料也应认真检查，对 可能被蜗牛污染的物品可用高压水枪冲洗检查或做预防性的熏蒸灭蜗处理。蜗牛爬行过后，都会留下 银灰色的丝带状黏液痕迹，这是判定是否有蜗牛污染的重要依据。发现蜗牛标本，随时装入塑料自封袋 或标本瓶带回实验室做进一步的检验鉴定。发现盆景等携带土壤或其他细碎衬垫材料时，需过筛检查 是否有卵或幼螺。 8实验室鉴定 8.1测量、观察、解剖和饲养 用游标卡尺测量蜗牛贝壳的壳高和壳宽、卵粒直径。用肉眼或放大镜或体视显微镜仔细观察卵和 螺的形态特征。 2