SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4485—2016 进出口口腔清洁类产品中 洋葱伯克霍尔德菌检验方法 Method for detection of Burkholderia cepacia in oral sanitary appliances for import and export 行业标准信息服务平台 2016-06-28发布 2017-02-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4485—2016 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准负责起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检 疫局。 本标准主要起草人：韩伟、刘夏、谢小珏、黄菁菁 行业标准信息服务平台 1 SN/T 44852016 进出口口腔清洁类产品中 洋葱伯克霍尔德菌检验方法 1范围 本标准规定了进出境口腔清洁类产品中洋葱伯克霍尔德菌的检验方法。 他伯克霍尔德菌的检验可参考使用。 2 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB19489实验室生物安全通用要求 3设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a) 天平：感量0.1g。 b) 锥形瓶或烧瓶。 c) 玻璃珠。 d) 膜过滤系统。 e) 无菌滤膜，孔径0.45μm。 f) 无齿镊子。 g) 吸管：10mL及1mL，分刻度0.1mL。 示准信息服务平台 h) 灭菌平皿：直径90mm。 培养箱：35℃土1℃。 j) 接种环：直径3mm及1mm。 k) pH计或pH比色管或pH精密试纸 1) 显微镜：10×~100×。 m）全自动微生物鉴定系统。 4 培养基和试剂 4.1 SCDLP液体培养基：见A.1。 4.2 改良LETHEEN氏肉汤：见A.2。 洋葱伯克霍尔德菌琼脂：见A.3。 4.4 营养琼脂：见A.4。 3%过氧化氢溶液：临用前配制。 4.6 O/F试验管：见A.5。 1 SN/T 4485—2016 4.7 无菌液体石蜡。 4.8 赖氨酸脱羧酶试验培养基：见A.6。 4.9 精氨酸双水解酶培养基：见A.7。 4.10 碳源利用培养基：见A.8。 4.11 西蒙氏柠檬酸盐培养基：见A.9。 4.12 半固体琼脂培养基：见A.10。 4.13 非发酵菌生化鉴定试剂盒。 检验程序 5 洋葱伯克霍尔德菌检验程序见图1。 固体样品（牙膏、牙粉） 液体样品（漱口水、口气清新喷雾） 10g+90mL稀释液 10mL+90mL稀释液 0.45μm滤膜过滤 10mL稀释液加入90mL改良LETHEEN氏肉汤 滤膜投入50mL改良LETHEEN氏肉汤 35℃±1℃，48h±2h 洋葱伯克霍尔德菌琼脂 35℃±1℃，48h±2h 染色镜检，过氧化氢酶阳性， 行业标 氧化分解葡萄糖，赖氨酸脱羧酶阳性 生化鉴定 报告 6操作步骤 6.1样品制备 6.1.1 固体样品 牙膏或牙粉等固体样品，称取10g，加到装有玻璃珠及90mL的SCDLP液体培养基的三角瓶中， 充分振荡混勾，静置15min，作为1：10的稀释液。 2