SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4283.1—2015 国境口岸微孔板基因芯片检测方法 第1部分：通用技术规程 Test method of microplate gene chip at frontier port- Part 1:General technical procedure 行业标准信息服务平台 2015-05-26发布 2016-01-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 国境口岸微孔板基因芯片检测方法 V第1部分：通用技术规程 SN/T 4283.1-2015 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029） 务平台 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010）68533533 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×1230 01/16 印张0.75字数18千字 2016年2月第一版2016年2月第一次印刷 印数1-1100 * 书号：155066：2-29606 定价16.00元 SN/T 4283.1—2015 前言 SN/T4283《国境口岸微孔板基因芯片检测方法》为系列标准，分为六个部分： 第1部分：通用技术规程； 一第2部分：结核分枝杆菌及katG和rpoB耐药变异基因； 第3部分：7种呼吸道病毒； 一第4部分：肠道病毒及肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型； 第5部分：肺炎支原体、肺炎衣原体及嗜肺军团菌； 第6部分：12种食源性致病菌。 本部分为SN/T4283的第1部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本部分起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民 共和国新疆出人境检验检疫局、中华人民共和国四川出人境检验检疫局、中华人民共和国甘肃出入境检 验检疫局、中华人民共和国河南出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出入境检验检疫局、清华大学 深圳研究生院、深圳市南山区慢性病防治院、珠海精标仪器有限公司、深圳图普科技有限公司。 本部分主要起草人：顾大勇、辛本强、董瑞玲、廖凌、樊学军、高国龙、刘芳、赵芳、刘春晓、杨燕秋、 张树平、史蕾、赵纯中、何建安、刘君、徐媛、林勤丰、徐云庆、张勤、黄恩炯、马岚、张涛、李永进、倪秀、 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4283.1—2015 国境口岸微孔板基因芯片检测方法 第1部分：通用技术规程 1范围 SN/T4283的本部分规定了微孔板基因芯片检测方法的通用技术规程，包括微孔板基因芯片的制 备、检测流程、结果报告及阳性结果的处置等部分 本部分适用于在国境口岸实验室采用微孔板基因芯片技术进行检测 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB19489实验室生物安全通用要求 WS233微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 微孔板基因芯片microplategenechip 与传统的基于玻片或膜的平面式基因芯片不同，其将基因探针按预设模式固定在微孔内，每孔即为 一张芯片。本部分涉及的微孔板基因芯片技术具有如下特点：（a）芯片的载体为高分子材质的微孔板， 类似于8×12的ELISA反应板，每孔即为一张芯片。可以整板使用有最多96个反应孔，也可以根据实 际需要拆装所需的反应孔数，具有微量、高通量的特点。（b）芯片反应孔面无需有机薄膜涂层修饰或化 学生物等的修饰，可直接将基因探针点样到孔面上，在紫外作用下通过氢键结合，使包被的探针不易脱 落，具有芯片制备操作简单方便的特点。（c）芯片检测采用化学显色反应的检测方式，其检测原理为生 物素化的PCR产物与芯片杂交，经由链霉亲和素-碱性磷酸酶介导的显色反应在芯片表面形成色点沉 积，检测结果裸眼可视也可借助芯片扫描仪进行定量分析，具有快速简便可视的特点。 3.2 特异性探针specificprobe 能与样品中的特异性目标核酸杂交，实现检测目的的一段寡核苷酸分子片段。 3.3 阳性对照探针positivecontrolprobe 能与预设的特定目标核酸杂交，但与检测目标核酸无交叉杂交反应的一段寡核苷酸分子片段，可以 用于实现对全部或部分检测流程进行质量控制。本部分涉及PCR阳性对照探针和杂交阳性对照探针。 3.4 阴性对照探针 negative control probe 即空白对照探针，可以是一段人工设计合成的没有配对杂交对象的或是与本试验无关的寡核苷酸 1