SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4279—2015 国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定 实验室管理规范 Administration requirement for DNA barcoding identification laboratory of medical insect at frontier ports 行业标准信息服务平台 2015-05-26发布 2016-01-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4279—2015 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局、中华人民共和国河北出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：邱德义、岳巧云、陈健、刘德星、聂维忠、魏晓雅、吴可量、胡佳。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4279—2015 国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定 实验室管理规范 1范围 本标准规定了国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定实验室应具备的条件和管理要求等。 本标准适用于国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定实验室（以下简称实验室）的建立和管理。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T22239信息安全技术信息系统安全等级保护基本要求 SN/T1876医学媒介生物标本采集、制作及保存规程 SN/T2752.4卫生检疫人员的自我防护规范第4部分：实验室人员 SN/T2776国境口岸医学媒介生物监测实验室管理要求 WS/T230临床诊断中聚合酶链反应（PCR)技术的应用 3术语 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 DNA条形码DNAbarcode 生物体内能够代表该物种的、标准的、有足够变异的、易扩增且相对较短的DNA片段。DNA条形 码已经成为物种鉴定的重要工具，在医学媒介昆虫中，一般是指线粒体COI（线粒体细胞色素C氧化酶 亚基I)上的658bp的标准片段。 3.2 DNA条形码鉴定技术DNAbarcoding identification technique 一-种利用DNA条形码基因片段进行生物物种鉴定和系统进化关系研究的技术，建立在基因扩增 和序列比对的基础之上，它具有不受物种发育状态、雌雄性个体及形态特征完整性与否的限制、减少对 分类专家的依赖、不受主观因素影响、准确率高、借助互联网可以实现数据共享等特点。 3.3 国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定实验室 DNA barcoding identification laboratory of medical in- sect at frontier ports 对国境口岸地区及出人境交通工具、货物、集装箱、行李、邮包等截获或者本底调查中所获得的医学 媒介昆虫利用DNA条形码技术进行鉴定的实验室。除此之外，该实验室还具有媒介昆虫种属鉴定和 标本制作等功能。 1 SN/T 4279—2015 3.4 医学媒介昆虫medicalinsects 其幼体或成体通过叮咬或者与人类密切接触，直接或者间接地将所携带的病原体传播给人、畜，并 使人、畜致病的昆虫纲动物，主要包括蚊类、蝇类、蛋、螺类和蚤类等。广义的医学媒介昆虫还包括其 他节肢动物，如蜱、螨（蛛形纲）等。 3.5 凭证标本voucherspecimen 获取DNA条形码等分子数据的来源标本。可以是一头标本的身体上的一部分组织，也可以是同 一批同种标本中的一个个体，但必须与本标本的DNA条形码数据等分子凭证是一一对应的关系。凭 证标本的保存非常重要，必须有唯一性的标本编号、存放、鉴定以及采集等详细信息，以便于日后查证。 3.6 分子凭证 molecularvoucher 与凭证标本相对应的基因组DNA、PCR产物、DNA条形码序列及峰图，做克隆还应包括含DNA 条形码片段的阳性转化子。分子凭证的保存非常重要，必须有唯一性并和凭证标本一一对应的编号、存 放等详细信息，以便于日后查证。 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 BOLD：生物条形码数据系统（barcodingoflifedatasystem） NCBI：美国生物技术信息中心（NationalCenterforBiotechnologyInformation） 5管理要求 5.1 组织管理 5.1.13 组织管理应按照SN/T2776的要求，实行实验室主任负责制，设置技术负责人和质量负责人；建 立和完善实验室人员岗位职责。 5.1.2实验室应确保检测的规范性、公正性和独立性，不受商业、财务或其他利益冲突的影响 5.1.3实验室应制定和执行质量管理、人员监督程序，确保检测工作质量。 5.2 实验室质量管理 5.2.1实验室应建立质量管理体系文件并遵照实施。 5.2.2实验室质量管理体系文件应覆盖检测鉴定的整个过程。 5.2.3制定程序文件和操作规程的项目至少应包括：标本的制作及管理，仪器与设备的使用、维护和校 档案管理，数据库维护等。 5.3实验室功能分区 5.3.1根据检测流程分设试剂准备区、标本前处理区、核酸提取区、核酸扩增区、凝胶成像区、数据处理 区、标本室等，有条件的可以将每一区域设置为独立的房间。其中，核酸扩增区建设应符合WS/T230 的要求。 5.3.2鉴于DNA条形码扩增产物同源性高的特点，实验室需制定措施严防交叉污染，不同作业流程在 2