SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T0859—2016 代替SN/T0859—2000 出口调味料中脱氢乙酸的测定 紫外分光光度法 Determination of dehydroacetic acid in condiments for export- Ultraviolet spectrophotometric method 行业标准信息服务平台 2016-08-23发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0859—2016 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T0859—2000《进出口酱油中脱氢乙酸的测定方法》。本标准与SN/T0859- 2000相比，除编辑性修改外主要技术变化如下： 适用范围在原标准（酱油）的基础上，增加了醋、蚝油、烧烤汁、调味酱； 一增加了定量检出限（LOQ）的规定。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国广东出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：陈丹萍、杨富春、褚庆华、原波、谢应新、黎敏华 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： -SN/T0859—2000。 行业标准信息服务平台 1 SN/T0859—2016 出口调味料中脱氢乙酸的测定 紫外分光光度法 1范围 本标准规定了用紫外分光光度法测定出口调味料中脱氢乙酸含量的方法 本标准适用于出口酱油（生抽酱油、老抽酱油）、醋、蚝油、烧烤汁、调味酱中脱氢乙酸含量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3测定方法 3.1方法原理 样品中脱氢乙酸在酸性条件下经水蒸气蒸馏和有机溶剂萃取后，用紫外分光光度计在308nm波 长处测定吸光度，与标准比较定量 3.2试剂和材料 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯。水为GB/T6682规定的三级水。 3.2.115%（质量浓度）酒石酸溶液：称取酒石酸15g，加水溶解定容至100mL。 3.2.2氯化钠。 3.2.3硅氧树脂：液态，工业级作消泡用 3.2.4盐酸(p=1.19 g/mL)。 3.2.5盐酸溶液（1+9，体积比）：取10mL盐酸慢慢加入90mL水中。 3.2.6乙醚。 3.2.7碳酸氢钠。 3.2.81%（质量浓度）碳酸氢钠溶液：称取1g碳酸氢钠以水溶解定容至100mL。 3.2.92mol/L氯化钠溶液：称取11.7g氯化钠，以水溶解定容至100ml。 3.2.10 2mol/L盐酸溶液：量取16.7mL盐酸加水定容至100mL。 3.2.11 盐酸-氯化钠溶液：吸取2mol/L氯化钠溶液（3.2.9）50mL和2mol/L盐酸溶液（3.2.10） 1mL，混合后用水稀释至200mL。 3.2.12 2无水硫酸钠。 3.2.13氢氧化钠。 3.2.140.1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g氢氧化钠，以水溶解定容至1L。 3.2.15脱氢乙酸标准溶液：精确称取0.1000g脱氢乙酸标准品于6mL（0.1mol/L）氢氧化钠溶液 （3.2.14）中，加水稀释至100mL，即浓度为1mg/mL的标准储备液。使用时用水稀释为20μg/mL脱 氢乙酸标准工作液。 1 SN/T 0859—2016 3.3 仪器设备 3.3.1 紫外分光光度计，配1cm石英比色杯，波长范围110nm～900nm。 3.3.2 水蒸气蒸馏装置。 3.3.3 旋涡混合器。 3.3.4 恒温水浴锅。 3.3.5 感量0.01g的电子天平。 3.3.6 感量0.0001g的电子天平。 3.4 分析步骤 3.4.1 试样的蒸馏 称取10g（精确至0.01g）样品于100mL烧杯中，用100mL水分数次将样品全部转人500mL圆 底烧瓶中，并用15%（质量浓度）酒石酸溶液（3.2.1）调节样液至pH2~3，加入50g氯化钠（3.2.2）、2滴 硅氧树脂（3.2.3）（样品蒸馏时若泡沫不多可不加）、数粒玻璃珠，加水至总体积250mL～300mL，连接 水蒸气蒸馏装置进行蒸馏。以每分钟收集10mL馏出液的速度收集蒸馏液近200mL，转移人200mL 容量瓶，用水定容，即为蒸馏液的总体积VI。 3.4.2脱氢乙酸的提取及测定 3.4.2.1标准曲线的制作 试管中，分别加水至总体积10mL，然后分别加人0.8mL盐酸溶液（3,2.5）、2g氯化钠（3.2.2）。用乙醚 （3.2.6）分3次（10mL、5mL、5mL）涡旋振摇提取，合并上层乙醚提取液于另一50mL带塞刻度玻璃 试管中。将1%（质量浓度）碳酸氢钠溶液（3.2.8）分3次（10mL、5mL、5mL）加入已合并的乙醚提取 液刻度玻璃试管中再次提取，合并下层碳酸氢钠提取液于烧杯中，置水浴上小心地加温，待乙醚挥发后， 继续在水浴上滴加盐酸溶液（3.2.5）至pH3～5，分别移人25mL容量瓶中，加入2mL盐酸-氯化钠溶 液（3.2.11），加水稀释至刻度，混勾。用1cm石英比色杯，以零管调节零点，于波长308nm处测吸光 度，以脱氢乙酸的质量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线 3.4.2.2样品溶液的测定 移取3.4.1的蒸馏液10mL(Vz)于50mL带塞刻度玻璃试管中，然后按照3.4.2.1的步骤执行。同时做试 剂空白。根据样品溶液的吸光度，由标准曲线计算得到样液中脱氢乙酸的质量mA，单位为微克（ug）。 总服务平 4脱氢乙酸含量的计算 按式（1）计算试样中脱氢乙酸的含量： mAX1000 X= ........() mX (Vz/V)X 1 000 式中： X一一试样中脱氢乙酸的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 测定用样液中脱氢乙酸质量，单位为微克（μg)； mA 试样质量，单位为克（g）； Vi-i 试样蒸馏液总体积，单位为毫升（mL）； 2