SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3848—2014 出口食品中茶多酚的检测方法 高效液相色谱法 Determination method of tea polyphenol residues in foods for export- HPLC method 行业标准信息服务平台 2014-04-09发布 2014-08-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3848—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国东莞出人境检验检疫局检验检疫综合技术中心、中华人民共和国北京出 境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：付登洲、李小林、李菊、黄伟、杨雪娇、温健昌、王伟、张江锋。 行业标准信息服务平台 H SN/T3848—2014 出口食品中茶多酚的检测方法 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了出口食品中茶多酚的高效液相色谱检测方法。 本标准适用于食用油、糕点、方便米面、油炸食品及肉灌肠中表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、 表没食子儿茶素（EGC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）及表儿茶素（EC）的测定，不适用于茶及茶制品。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 食用油经甲醇超声提取，冷冻、离心，其他试样用正已烷提取，提取液经冷冻、离心后，高效液相色谱 仪检测，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1乙：色谱级。 4.2甲醇：色谱级。 4.3甲酸：色谱级。 4.4表没食子儿茶素没食子酸酯标准品（EGCG）：CAS号989-51-5，分子式C22H1O11，相对分子质量 458.37，纯度大于等于95%。 4.5表没食子儿茶素标准品（EGC)：CAS号970-74-1.分子式C15H14O7，相对分子质量306.27，纯度大 于等于95%。 4.6表儿茶素没食子酸酯标准品（ECG）：CAS号1257-08-5，分子式C15H18O1o，相对分子质量442.37， 纯度大于等于92%。 4.7表儿茶素标准品（EC)：CAS号490-46-0，分子式C15H14O6，相对分子质量290.27，纯度大于等 于97%。 4.8茶多酚组分标准储备溶液：准确称取适量的EGCG、EGC、ECG、EC标准品（精确到0.0001g），用 甲醇溶解并定容至10mL，即得EGCG、EGC、ECG、EC浓度分别为0.5mg/mL的标准储备液，0℃~ 4℃下保存，有效期两周。 4.9茶多酚组分混合标准工作液：根据需要分别取适量上述茶多酚组分标准储备溶液，用水稀释成适 当浓度的混合标准工作溶液，现用现配。 4.10微孔滤膜：0.45μm，有机相。 1 SN/T3848—2014 5仪器和设备 5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器/二极管阵列检测器。 5.2天平：感量为0.0001g和0.01g。 5.3离心机：转速不低于6000r/min。 5.4旋涡混合器。 5.5具塞离心管：聚四氟乙烯，10mL。 6分析步骤 6.1试样制备与保存 6.1.1植物油类 将所取原始样品1kg在试样桶内充分混匀，再将混匀样品分装至洁净容器内密封，作为试样，并标 明标记，于0℃～4℃保存。 6.1.2糕点、方便米面、油炸食品 取有代表性样品1kg，将样品按四分法缩至200g，在粉碎机中粉碎，再将混勾样品分装至洁净容 器内密封，作为试样，并标明标记，于0℃～4℃保存。 6.1.3 3肉灌肠 取有代表性样品1kg，将样品按四分法缩至200g，所取样品经组织捣碎机捣碎，再将混匀样品分 装至洁净容器内密封，作为试样，并标明标记，于0℃～4℃保存。 在制样的操作过程中，应防止样品受到污染。 6.2试样处理 6.2.1食用油处理 称取2g试样（精确到0.001g)于10mL带刻度具塞离心管中，加入甲醇定容至10mL，混匀，涡旋 振荡2min，超声20min，在一18℃冰柜中冷冻10min，以6000r/min离心5min，上清液经0.45μm 微孔滤膜过滤，滤液供高效液相色谱仪待测。 6.2.2各类糕点、方便米面制品、油炸食品等含油脂的固体样品及肉灌肠处理 称取2g试样（精确到0.001g）于250mL具塞锥形瓶内，加入50mL正已烷振荡提取，用滤纸过滤 至250mL圆底烧瓶中，重复3次，合并滤液，于40℃水浴中旋转蒸发至近干，加入少许甲醇，振摇溶解 提取液（必要时40℃水浴中超声溶解），移入10mL带刻度离心管中，用少量甲醇冲洗圆底烧瓶3次， 洗涤液并人离心管中，定容至10mL，混勾、涡旋、冷冻、离心，上清液经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液供 高效液相色谱仪待测。 6.3高效液相色谱测定 6.3.1色谱条件 色谱条件如下： 2